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【論文分享】抗生素誘導革蘭陰性桿菌釋放內毒素的實驗研究(一)

發布時間:2019-10-17
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關鍵詞:

抗生素、細菌內毒素感染、鱟試劑、廈門鱟生科產品介紹。


摘要:

實驗論文包括實驗目的、實驗方法、實驗結果和實驗結論四部分。


徐能武 袁建成 肖光夏 鄭江 秦孝建

迄今為止,感染尤其是革蘭陰性(G-)桿菌感染導致的膿毒癥及膿毒性休克,仍是嚴重燒傷、創傷患者的主要死亡原因之一[1,2],而抗生素的使用是治療G-菌感染的重要手段。但近年來的研究表明[3- 6]:應用某些敏感抗生素治療G-菌感染時,雖能有效殺滅細菌,卻同時誘導G-菌釋放大量內毒素(lipopolysaccharide, LPS),其誘導力因抗生素的種類不同而異。LPS是燒傷膿毒癥及膿毒性休克發病機制中的關鍵致病因子,但目前尚無可供臨床實用的LPS拮抗劑[7,8],因此不同抗生素誘導G-菌釋放LPS能力的差異,最終將影響到治療效果。本實驗選擇目前臨床上G-菌感染中2種主要的致病菌綠膿桿菌和大腸桿菌,同時選擇最常用的3類抗生素:β-內酰胺類、喹諾酮類及氨基糖甙類,觀察其對體外綠膿桿菌和大腸桿菌的殺菌效能、細菌形態學變化、誘導細菌釋放LPS能力等,為臨床治療G-菌感染時,正確選擇抗生素提供實驗依據。


材料與方法

一、材料

1.細菌:綠膿桿菌(Pseudomonas aeruginosa103,PA103)和大腸桿菌(Escherichia coli 25922,E.coli 25922),由第三軍醫大學微生物教研室提供。


2.抗生素:亞胺培南(Imipenem, IMP),美國默克公司默沙東藥廠,批號V5134。頭孢他啶(Cef-tazidime, CTZ),英國葛蘭素威康公司,批號B4166GA。培福新(Pefloxacine, PFX),法國羅鈉普朗克公司樂安制藥廠,批號114。硫酸丁胺卡那霉素注射液(Amikacin sulfate Injection, AMN),上海旭東海普藥業有限公司,批號970307。


3.試劑:(1)鱟試驗專用鱟試劑,廈門鱟試劑生物科技,批號980225;鱟試劑溶解水,廈門鱟試劑生物科技,批號980125。


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注:實驗方法此處省略,如有需要可聯系我司獲取。



省略部分實驗結果)

實驗結果


1.抗生素孵育后細菌菌量變化:(1)除0.5 MIC外,4種抗生素分別以終濃度1、5、10MIC作用于綠膿桿菌,各時相點細菌菌量與對照組相比明顯減少,其中以IMP殺菌作用最快,CTZ和PFX次之,AMN較差,但4種抗生素之間差異無統計學意義,見圖1。(2)4種抗生素分別以0.5、1、5、10 MIC終濃度作用于大腸桿菌,殺菌曲線的變化趨勢及抗生素殺菌效能間的差異與PA103組相似。


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2.抗生素誘導細菌釋放LPS的變化:(1)對照組:隨著孵育時間的延長,兩種細菌自發釋放LPS的量逐漸增加,各個時相點大腸桿菌的LPS水平明顯高于綠膿桿菌,兩者間的差異有顯著或非常顯著性意義(P< 0.05~ 0.01,表1)。(2)抗生素組:當4種抗生素以0.5、1、5和10 MIC濃度分別作用于兩種細菌后,均可影響細菌LPS的釋放,其誘導力與抗生素的種類、濃度、作用時間及菌種有關。


3.抗生素種類和作用時間的影響:當4種抗生素濃度和作用時間相同時,細菌釋放LPS的誘導力為:CTZ> PFX> IMP> AMN。隨著抗生素作用時間的延長,誘導細菌釋放LPS的量也逐漸增加,但各時相點釋放的速率并不相同(圖2)。


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部分參考文獻

1 Glauser M P, Heumann D, Baumgartner J D, et al. Pathogenesisand potential strategies for prevention and treatment of septicshock: an update. Clin Infect Dis,1994,18:S205- 216.

2 Holzheimer RG,Hirte J F, Reith B,et al.Different endotoxin re-lease and IL- 6 plasma levels after antibiotic administration in sur-gical intensive care patients. J Endotoxin Res,1996,3:261- 267.

3 Jackson J J, Kropp H.Differences in mode of action ofβ- lactamantibiotics influence morphology, LPS release and in vivo antibioticefficacy. J Endotoxin Res,1996,3:201- 218.

4 Healy DP, Verst- Brasch CL, Clendening CE, et al. Influence ofdrug class and dose size on antibiotic- induced endotoxin/ IL- 6release and impact on efficacy of anti- endotoxin antibody.J Endo-toxin Res,1996,3:219- 227.

5 Prins JM.Antibiotic induced release of endotoxin- clinical date andhuman studies. J Endotoxin Res,1996,3:269- 273.

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